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療效研究

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  • 東當歸乙醇提取物對小鼠學習記憶的影響

    日期:2012-12-28 10:30

    摘要:目的觀察東當歸乙醇提取物對記憶障礙模型小鼠的作用效果。方法應用氫澳酸東蔑勞堿注射液(scoP)制備小鼠記憶障礙模型,采用避暗實驗、跳臺實驗、水迷宮實驗和Y型電迷宮穿梭實驗等方法觀察不同劑量東當歸乙醇提取物對記憶障礙模型小鼠的作用效果。結果與模型組比較,東當歸乙醇提取物中、高濃度組均能改善記憶障礙,作用強度類似于石衫堿甲。結論東當歸乙醇提取物對SCOP誘導的小鼠記憶障礙具有良好的改善作用。

    關鍵詞:東當歸;學習記憶;避暗實驗;跳臺實驗;水迷宮實驗

    中圖分類號:8285.5文獻標識碼:B文章編號:1008-0805 (2009 ) 08-2043-01

    老年癡呆是一種異質性疾病,具有特征性神經病理和神經化學改變,發病多為老年前期,但老年期的發病率更高}' } 0 65歲以上老人中明顯癡呆者約占2% -5%,而85歲以上的老人中幾乎一半患有不同程度的老年癡呆。當歸芍藥散是由當歸、芍藥、川芍、獲等、白術、澤瀉組成的傳統中藥處方,國內外文獻報道其對老年癡呆癥具有一定的治療效果fz,s7。但是當歸單味藥材對老年性癡呆療效研究報道不多。因此,本實驗主要研究東當歸乙醇提取物對小鼠學習記憶的改善作用。

    1材料與儀器

    1.1動物實驗用小鼠,購于延邊大學藥學院動物科,體質量(20士2)g。

    1.2試藥與儀器東當歸,氫嗅酸東蓑若堿注射液(SCOP)(上海禾豐制藥有限公司),石杉堿甲(河南竹林眾生制藥股份有限公司),無水乙醇為分析純,蒸餾水。YLS一3T型跳臺記錄儀(山東省醫學科學院設備站),RE一52C旋轉蒸發儀(上海申生科技有限公司),方型水迷宮儀(中國醫學科學院藥物研究所),Y型電迷宮儀(中國醫學科學院藥物研究所)。

    2方法

    2. 1東當歸乙醉提取物的制備東當歸粉碎過20目篩,準確稱取,加人8倍量80%乙醇加熱回流提取2h,共3次,合并濾液,減壓抽濾,將濾液于水浴上減壓蒸餾至無醇味,得到當歸的乙醇提取物。

    2. 2實驗藥物劑量設置東當歸高劑量為500 mg/kg,中劑量為250 m歲kg,低劑量為125 mg/kg,氫澳酸東食若注射液2 mg/kg,石杉堿甲85 },g/kgo

    2. 3實驗設計對小鼠學習記憶改善作用的研究實驗分別采用避暗實驗、跳臺實驗、水迷宮實驗、Y型迷宮穿梭實驗。實驗小鼠隨機分為6個組,每組含8一10只動物。實驗給藥劑量組分為石杉堿甲組(陽性組),SCOP組、空白組、東當歸乙醇提取物高劑量組(東當歸A組)、東當歸乙醇提取物中劑量組(東當歸B組)、東當歸乙醇提取物低劑量組(當歸C組),連續灌胃30 d,期間所有動物自由進食飲水,小鼠末次給藥后除空白組外,其余各組均注射SCOP,10 min后進行各組實驗。

    2. 3.1避暗實驗采用被動回避性條件反射儀進行避暗實驗,將小鼠面部背向洞口放入明室,同時啟動記錄裝置,記錄小鼠第1次進入暗室的時間,此為觸電潛伏期,并記錄5 min內小鼠進人暗室的錯誤次數作為記憶指標,24 h后重復測試。

    2.3.2跳臺實驗將小鼠放人跳臺反射箱內適應3 min,然后通以38 V交流電,小鼠受到電擊后多數跳上跳臺逃避電擊。記錄小鼠第1次跳下時間,此為觸電潛伏期,并記錄5 min內小鼠跳下次數,24 h后重復測試。

    2.3.3水迷官實驗造模后10 min進行水迷宮訓練。第1次訓練將小鼠放在安全臺附近G4處,讓其自行游上終點兩次,第2次訓練將小鼠放在中部G2,G3處,然后第3次訓練時讓小鼠游全程。設定時間為2 min,超過2 min不能游出者按2 min計。記錄小鼠自迷宮起點游至安全臺所需時間和途中進人盲端的錯誤次數,連續測試4 do

    2.3.4 Y型迷宮穿梭實驗測試前將小鼠放置起步區的反射臂中,不通電,讓小鼠在三臂中進行探索,約2一3 min待其穩定后將小鼠抓至起步區,燈亮后2s時,給予電刺激,直至小鼠最終逃到安全區后30 s,熄燈,作為一次測驗。在24 h后檢測小鼠10次訓練中的正確次數。

    2. 4統計學方法應用SPSS 13. 0統計分析軟件進行統計學處理,實驗數據以x士;表示,采用t檢驗,以尸<0.05為有統計學差異。

    3結果

    3.1避暗實驗測試結果各組小鼠避暗實驗潛伏期和錯誤次數比較見表1。

    4討論

    東當歸是傘形科植物,化學成分主要含揮發油、有機酸、氨基酸、維生素等多種物質,阿魏酸鈉也是當歸中有效單體成分,具有抗氧化、抗自由基、抗炎等藥理作用,有研究表明阿魏酸鈉能對抗A(3引起的小鼠學習記憶損傷,改善小鼠的學習記憶功能川。

    本研究通過進行避暗實驗、跳臺實驗、水迷宮實驗、Y型電迷宮穿梭實驗,均得出較相一致的結論,即在末次造模后,模型組與空白組比較,模型組成績明顯差于空白組,表明造模建立成功;東當歸低濃度組與模型組比較無顯著性差異;東當歸中、高濃度組與模型組比較,成績明顯優于模型組。其中,中濃度組效果更加明顯;東當歸中、高濃度組都與石杉堿甲組比較無顯著性差異。以上實驗結果表明東當歸乙醇提取物中、高濃度組對記憶障礙小鼠有良好的改善作用,其作用強度類似于石杉堿甲,為開發臨床治療老年癡呆癥藥物提供理論依據,具有一定的研究價值。
     

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